快速細菌檢驗方法
摘要：水的微生物學上的衛生狀態是以大腸菌群或希氏大腸菌評價的。但現今采用的檢驗方法（以下稱現有法），從判斷試驗、確認試驗到全面試驗得到最終結果，在陰性的場合試驗時間為2 日，陽性的場合要達到確認試驗為4日，完成全面試驗則需要5 日。從而，在確定原水受污染以前，污染的水就會被居民飲用，給居民增加很大的負擔。另外以現有法檢驗對象的大腸菌存在于自然環境中，直接與人體健康有害的作為指標的細菌，特別是埃希氏大腸菌的試驗，還沒有快速且準確的良好檢出試驗方法。最近新的試驗方法已被開發出來。這種方法能夠在24小內將大腸菌和埃希氏大腸菌同時檢出，相當實用。
關鍵字：快速 細菌 檢驗
1、前言
水的微生物學上的衛生狀態是以大腸菌群或希氏大腸菌評價的。但現今采用的檢驗方法（以下稱現有法），從判斷試驗、確認試驗到全面試驗得到最終結果，在陰性的場合試驗時間為2 日，陽性的場合要達到確認試驗為4日，完成全面試驗則需要5 日。從而，在確定原水受污染以前，污染的水就會被居民飲用，給居民增加很大的負擔。另外以現有法檢驗對象的大腸菌存在于自然環境中，直接與人體健康有害的作為指標的細菌，特別是埃希氏大腸菌的試驗，還沒有快速且準確的良好檢出試驗方法。最近新的試驗方法已被開發出來。這種方法能夠在24小內將大腸菌和埃希氏大腸菌同時檢出，相當實用。
2、試驗方法和試驗研究目的
這種方法是在臨床實驗室中以特定基質法概念作為基礎，將尿中微生物識別出來。作為試驗目的遠規定的這一方法，單單只是利用細菌繁殖的僅有特定的基質這一點而言，就與現有法不同。其培養劑是硫酸銨（氨素來源）、鹽類維他命、加上兩種加水有分解可能的基質，這兩種基質及作用為，（1）利用鄰-硝基苯-半乳糖吡喃苷加水分解反應，使大腸菌群由無色變成黃色，（2）利用場-甲基傘形苯-葡萄酸苷加水分解反應使埃希氏大腸菌發出明顯螢光。這種生物反應化學的反應機理非常特別，因此不需要做確認試驗。
為了把此方法在供水上應用于檢測細菌，在供水研究基金會和美國環保局支持下，進行了法和當前使用的多管發酵管法及濾膜法調查比較。本次研究的目標有以下12項。
*大腸菌群及埃希氏大腸菌以cfu/100ml的濃度檢出。
*存在于起始濃度的菌類，在4-24小時內有確認結果。
*在沒有做大腸菌和埃希氏大腸菌的確認試驗及識別試驗的情總況下，能同時定量。
*規定用埃希氏大腸菌認定。
*不受HPC細菌妨害。
*總費用減少。調整完畢后的試藥即使不冷藏也可長期保存。
*在腸菌群繁殖和目標微生物代謝呈色的反應等相當明確，不需要有確認追加試驗。
*有否試驗必要計數的場合，能用法試驗。
*試驗方法掌握簡單。
*小型供水及大型供水用此方法都適當。
在經同意此調查的多數供水事業單位合作下，進行了廣泛的調研。試樣由所有配水系統采取。
3、結果
不論使用法或法的哪一種手段，當今使用的方法和法，在統計上都沒有意義的差別。兩種方法決定系數0.78,認為有很高的相關系統數。從而兩種方法所得結果，在質上其數據基底是相同的。因此，供水事業單位雖然改用法，當前使用的數據庫依然能夠有效。
以法的陽性管做二次培養，調查是否存在目標微生物。但在以法為陽性場合，必定存在有作為目標的微生物，因此，不必做確認試驗。
４、考察
由于法的特殊優越性，已在使用上證明有著充分的感應效果。所以美國環保局于1992年在施行的新規則中、認定了此新的大腸菌群和埃希氏大腸菌的檢測方法，并已于標準法18版刊載。有幾個重要優點。因為現有法必須以乳糖為基本培養劑，其做確認試驗得到結果要用幾天時間，而法在于24小時以內就可確認結果，適時的得到凈水微生物情況的水質情報，因此就可大大的節省經費。水質試驗室已有做大腸菌群試驗的細菌培養箱，因此要添設的必要設備，只需要添設廉價紫外線燈而已。隨之在人員雇用經費的節約上，由于在培養調整，試樣分析，確認試驗，洗刷試驗器具等方面，使試驗室人員操作的便利性有所提高。分析時向節約解決了新規則需要增加的試樣數量和復雜的要求。
其他的優點是，用這種方法的以糞便性大腸菌群做的試驗，沒有受到假陽性的溫度耐性的克雷伯氏菌屬的妨害。供水事業單位在大腸菌群試驗為陽性的場合下，在整體上，由于行使糞便性微生物（糞便性大腸菌或埃氏大腸菌）試驗要求，所以有此種克雷氏菌屬的繁殖，必須向管理居民健康的監督官報告。普通見到的一種大腸菌群的克雷伯氏菌屬，有約法三章15%的有著溫度耐性。因此這樣事態經常發生。克雷伯氏菌屬雖常存在飲用水中，但對人體健康無害處，由于證明攜帶這種菌的式樣，對飲用者健康沒有風險，因此也就沒有再采樣與再試驗的必要性。這種方法已有多數國家開始應用，并利用其于發國家地區水道調查，颶風和地震后的水質評價，供水管道更新后配水系統污染評價等。
在這種有利的情況下，法就成為給水新型的分析手段，它增強了效率，并是投資少收效高的微生物水質監測方法。此試驗方法于數年內，在供水事業單位和有關涉及健康的組織普及，而未發生誤碼差（本雜志1989-1有詳細介紹）。
在會議中，除此以外，還利用根據將共同存在于腸內細菌科的細菌抗原檢出的新免疫學法，迅速檢出腸內細菌科的細菌的方法，作為迅速試驗方法的提案提出。
這種方法由醫科大學和給水研究所共同研究開發，它是以乳糖、胨、肉湯繁殖細菌培養以后，將存在于外膜的氨基糖連續鏈結合——葡萄糖——磷脂酰殘基（與腸內細菌科共同而且僅限定于此的特異病原），以抗體的免疫學的方法檢出。檢驗利用多層的用4小時完成。檢驗范圍105——106細菌數/ml，必須有前培養程序。它是在整個試驗時間24小時，在100 ml中檢出1個埃希氏大腸菌或1 個大腸菌群的方法。
此方法在給水實際運行當中很適合應用，并已得出良好的效果。
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